BCA蛋白定量试剂盒测定工作原理

  BCA蛋白定量试剂盒测定工作原理

  BCA蛋白测定法是在碱性环境下，通过蛋白将Cu2+还原为Cu1+，再通过二辛可宁酸(BCA)来检测亚铜阳离子(Cu1+)。步是铜与碱性环境中的蛋白质螯合，形成浅蓝色复合物，这一过程被称为双缩脲反应。在该反应(双缩脲反应)中，由三个或多氨基酸残基的肽在含酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合复合物。

  在显色反应的第二步中，BCA与步形成的还原型(亚铜)阳离子发生反应。两分子BCA与一个亚铜离子螯合，产生深紫色反应产物。BCA/铜复合物是水溶性的，在562 nm处具有强线性吸收，且吸收度随蛋白质浓度增加而升高。该复合物的灵敏度(检测下限)大约是个反应中淡蓝色的100倍。

  反应很大程度上受到蛋白氨基酸序列中四个氨基酸残基(半胱氨酸、胱氨酸、酪氨酸和色氨酸)的影响。然而，不同于考马斯染料结合法，肽链也有助于颜色形成，因此可将不同蛋白间的测量差异降至低。

  BCA蛋白定量试剂盒的特点包括：

  •比色法测量—可以目测评估，也可使用标准分光光度计或酶标仪(562 nm)进行测量

  •高度一致性—与染料结合法(Bradford)相比，BCA定量法的蛋白间差异小

  •兼容性强—在大多数离子型和非离子型去污剂的常见浓度下，性能不受影响

  •定量时间—30分钟孵育;与传统Lowry法相比，操作简单，且检测速度快4倍

  •检测范围—BSA的线性工作范围为20至2000µg/mL

  •高灵敏度—使用增强方案，可检测浓度低至5µg/mL的样品

  BCA蛋白定量试剂盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品，励志研发和销售的综合性生物公司，产品远销多个国家和地区，我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向，不断开发高质量的新产品，提供客户满意的综合服务质量"的方针。古朵试剂盒