培养基如何消除组织培养的污染?

  培养基如何消除组织培养的污染?

  培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持用的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。培养基一类型细胞没有固定的培养条件。然而在开始进行新的细胞培养时，需要消除组织培养的污染，其步骤如下：

  ① 在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞，稀释到常规细胞传代的浓度。

  ② 分散细胞悬液到多孔培养板中，或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内，把选择抗生素加入到每一个孔中。

  ③ 每天观测细胞毒性指标，如脱落，出现空泡，汇合度下降和变圆。

  ④ 确定抗生素毒性水平后，使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。

  ⑤ 在无抗生素的培养基中培养细胞一代。

  ⑥ 重复步骤4。

  ⑦ 在无抗生素的培养基中培养4-6代，确定污染是否以已被消除。

  在进行新的细胞培养时，必须先消除组织培养的污染， 这样才不会影响实验的效果。

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