ELISA 实验基本原理及必要的试剂您知道吗?
ELISA主要方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,然后利用酶标记(偶联)的抗体或抗原与之孵育,加入显色剂显色,通过酶标仪测定待测物颜色与标准物颜色的差异,绘制出酶活曲线得出待测物浓度,大家跟着古朵生物一起去了解ELISA的基本原理和实验中必要的试剂吧。
ELISA的基本原理有三条:
(1)抗原或抗体能以物理性地吸附于固相载体表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫学活性;
(2)抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性;
(3)酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。
ELISA实验中有三种必要的试剂:
1、固相的抗原或抗体(用于结合到固相载体上);
2、标记的抗原或抗体(标记物);
3、作用的底物(显色剂,用于显色)。
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