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白介素6的实验原理?

已关闭 悬赏分:0 - 提问时间 2023-06-08 14:16

  白介素6的实验原理?

  IL-6简介:

  白介素6(IL-6)是一类多功能的蛋白,在宿主防御,急性期反应,免疫反应,造血功能,神经系统等方面起到重要的作用。根据来源不同,白介素6分子量从21到28kDa不同,但均为单链蛋白。白介素6在多种细胞中都有表达,如T细胞、巨噬细胞、纤维原细胞、肝细胞、血管内皮细胞等。由于IL-6具有不同的活性,所以IL-6也被称为干扰素β2(IFN-β2)、B细胞刺激因子-2(BSF-2)、杂交瘤细胞生长因子、肝细胞刺激因子、毒性T细胞分化因子、巨噬细胞粒细胞诱导因子(MGI-2A)等。白细胞介素6在B-细胞向Ig分泌细胞的转化过程起到重要的作用,参与了淋巴细胞和单核细胞的分化,诱导神经细胞在B-细胞,T-细胞,肝细胞,造血干细胞以及中枢神经系统的分化作用。此外,肌肉运动收缩作用后白细胞介素6会被释放到血液中,进而能促进脂肪的分解并改善机体的胰岛素耐受性。

  检测原理:

  本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中小鼠IL-6的浓度。小鼠IL-6捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的小鼠IL-6会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗小鼠IL-6抗体后,抗小鼠IL-6抗体与小鼠IL-6接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。zui后加入显色剂,若样本中存在IL-6将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,小鼠IL-6浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-6浓度。

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259 次关注     提问者: fanke001  


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