古朵教您ELISA试剂盒实验过程血清为何要稀释？

  古朵教您ELISA试剂盒实验过程血清为何要稀释？

  每一盒ELISA试剂盒试剂盒里面都有一份对应的说明书，而每一份说明书里都会有写样本和稀释液的稀释份额，为何样本都需求稀释呢?今日的文章中，古朵生物公司将为您剖析：为何ELISA实验血清样本都需求稀释?

  在ELISA试剂盒实验血清为何要稀释?有两个原因：

  1.比赛按捺对比明显，应稀释比赛物;

  2.以下降非特异性反应，使特异性的抗原抗体反应充分体现出来。

  血清稀释用一般的PBS即可，可加1%的BSA，能有用下降ELISA本底，当然假如你嫌费事我觉得用生理盐水代替PBS也不大。不管你是用直接比赛仍是直接比赛，血清的稀释倍数必定要事前确认，但也不必一点点，你做一个预实验即可，挑选OD在1.0左右的稀释倍数，即你的ELISA中阴性孔OD在1.0，这么作出来的曲线对比灵敏。

  ELISA试剂盒实验稀释血清的过程：

  1、先把蛋白稀释一定的倍数，比如说10倍、20倍稀释(这样可以大体确认一个参数)，将抗原进行一系列稀释包被微量反应板

  2、再用一定稀释度的阳性参阅血清和阴性参阅血清进行孵育后洗刷，再加酶结合物进行反应，经孵育洗刷后，加底物溶液显色，停止反应后分别测定O.D值，挑选O.D值≥1.0的那个抗原稀释度为zui适包被浓度。一般总是要挑选那个O.D值稍大于1.0，而不挑选小于1.0的抗原浓度。阴性参阅血清O.D值要求<0.1-0.2。也便是要求阳性参阅血清和阴性参阅血清的O.D值有明显差别。

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