什么是ELISA边缘效应?

  什么是ELISA边缘效应?

  边缘效应的定义是酶标板孔内中心部分与酶标板孔内远离中心部分之间相比存在明显的信号差异，一般归因于两个主要因素。

  孵育环境确实对实验有影响吗?

  是的。孵育时温度不均会引起边缘效应。请严格按照推荐的温度进行孵育。如果条件允许，可以在能够控温的孵育器中进行孵育。

  在使用之前将所有试剂平衡至室温。(除非特别说明)

  在实验开始之前检查工作的环境温度。如果曲线很平直，可能是由于工作环境温度低于气温所致。

  在孵育末期我注意到盖板一侧突起来了，这是否会影响我的实验结果?

  盖板如果使用不恰当会导致边缘效应。

  使用96孔板的ELISA测定中，常发现有“边缘效应”，即外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温(通常在25℃左右)置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度(如37℃)，就可以很容易地排除“边缘效应”，并且可提高测定的重复性。

  Elisa试剂盒还有就是在试验中，必定有运用微量加样器参加样本的步骤。提示留意：加样不行太快，要防止加在孔壁上部，不行溅出和发生气泡。ELISA试剂盒太快的话无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易致使非特异吸附。溅出会对附近孔发生污染。出现气泡则反响液界面有区别。所以，有时分一份标本用一样的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，通常就是上述加样及试剂的过错所造成的。

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