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elisa试剂盒操作常见问题?

已关闭 悬赏分:0 - 提问时间 2023-05-24 14:18

  elisa试剂盒操作常见问题?

  1.ELISA实验需要多长时间?

  双抗体夹心ELISA法次实验需要3.5-4小时,竞争ELISA法次实验需要2-2.5小时。2.血清样本如何处理?

  全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。3. 血浆样本如何处理?

  建议选择EDTA或者柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,于1000×g离心15分钟,仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。4.细胞上清液样本如何处理?

  检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(1000×g)。仔细收集上清。5.细胞裂解液样本如何处理?

  检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或者超声破碎,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心10分钟左右(5000×g)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。6.组织样本如何处理?

  用预冷的PSB (0.01M,pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g 离心5~10分钟,取上清检测。7.为什么有的试剂盒是采用竞争ELISA法?

  小分子抗原或半抗原因为缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法。其原理是标本中的抗原和固相载体上的抗原竞争抗体上的结合位点,标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的抗体愈少,后的显色也愈浅,即显色深浅与样本中的抗原浓度成反比。小分子激素等ELISA测定多用此法。8.用什么软件处理ELISA检测的数据比较好?

  ELISA标准曲线拟合可以应用Curve Expert软件进行数据分析。它使用非常方便,可以生成漂亮的曲线应用到论文之中。软件可以在下载中心进行下载。9. 试剂盒做的结果不理想怎么办?

  实验结果不理想请及时与客服或技术支持联系,我们可以帮您起分析实验结果。如果仅凭实验数据无法判断,您可以将试剂盒发回给我们进行售后检测。

  Elisa试剂盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求"的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量"的方针

466 次关注     提问者: fanke001  


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