ELISA实验是科研人员常常用到的实验办法。很多人觉得ELISA很简单,其实不然。今天古朵生物小编就带我们了解下ELISA实验的原理和常见办法。
实验原理
1.包被:抗原/抗体,固相化
2.反响: 1)待测抗体/抗原; 2)酶标抗原/抗体
3.洗刷:使结合在固相上的抗原抗体复合物与未结合的分别
4.底物显色:定性/定量剖析
常用办法
1.间接法
检测抗体常用的办法, 首要用于对病原体抗体的检测。
优势:二抗能够加强信号,并且有多种选择能做不同的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它多的免疫反响性。
缺陷:交互反响发作的机率较高
2.双抗体夹心法
检测大分子抗原常用的办法。
优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。
缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体结合部位。
3.竞争法
检测小分子半抗原(药物、激素等)。
优势:可适用比较不纯的样本,并且数据再现性很高。
缺陷:整体的敏感性和专一性都较差。
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