血清沉淀怎么办?古朵教您小妙招？

  血清沉淀怎么办?古朵教您小妙招？

  明明是一瓶优质的血清偏偏出现沉淀，和血清质量有关吗?会影响细胞培养吗?如何避免沉淀?出现沉淀如何处理?

  希尔博士说：“血清沉淀，其实属于常见现象，并不会影响血清的品质，大家不必惊慌!但很多人对这一现象还不是很了解。”为此，我们对“血清沉淀”的几个常见问题进行了总结，供广大科研人士参考。

  血清沉淀是什么?

  血清中经常会出现肉眼可见的沉淀，其成分有多种类型，产生的原因有很多，主要有纤维蛋白、磷酸钙还有一些其它成分。

  纤维蛋白(Fibrin)

  血清中肉眼可见的沉淀物大多属于这一类型。由于在生产过程中，血清采集、过滤(3 次 0.1 μm过滤)和灌装处理都是在低温条件下快速完成, 此时血清中纤维蛋白原(Fibrinogen)处于溶解状态。但在解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。


  1. 磷酸钙(Calcium Phosphate)

  这是一种常见的沉淀成分，通常会造成血清出现云雾状浑浊。当产品在 37℃保存时，这种现象尤其明显，在倒置显微镜下可观察到小黑点的存在。这些小黑点在布朗运动的作用下四处游动，常被误认为是微生物污染。

  2. 其他成分(Other)

  血清中的其他成分也会形成沉淀，例如胆固醇形成的油脂滴和其他蛋白沉淀等

  血清沉淀会影响细胞培养吗?

  1. 细胞生长

  我们在出厂前都会对血清进行一系列质检测试，确保血清质量达到严格标准。血清测试和细胞培养经验也表明，其沉淀成分不会影响血清作为细胞培养添加物的表现。这一点得到了众多客户和其他血清供应商的肯定。解冻之后, 血清中纤维蛋白原往往会发生凝集，形成肉眼可见的沉淀。

  2. 怀疑污染

  磷酸钙颗粒经常会被当成微生物污染而引发不必要的担忧。一般情况下，当操作人员融化血清后注意到有雾状浑浊时，常将其存放在 4℃冰箱中观察，并考虑接下来是否继续使用。但这样会使沉淀进一步增多，反而会使血清geng加浑浊，进而误以为存在血清污染。并且，在倒置显微镜下，可在血清中观察到四处游动的小黑点(磷酸钙颗粒的布朗运动)，geng容易使人误以为存在微生物污染。

  为防止这类误解的产生，我们不建议客户培养血清来验证是否存在污染，而是将血清直接接种在细菌培养基上进行培养，以观察是否有细菌的增殖。并且，进行革兰氏染色，并在油镜(100 X 10 倍)下观察可直接确认是否存在微生物污染。

  怎样操作可以尽量避免沉淀出现?

  1、正确解冻

  首先，应按照逐步解冻的方式正确解冻血清：从-20℃取出后，置于 4℃冰箱缓慢解冻，zui后置于室温完成解冻。如果直接从-20℃拿到室温或 37 ℃水浴解冻，则非常容易产生沉淀。在解冻过程中，请注意时不时缓慢摇晃瓶子，减少沉淀的产生。为避免反复冻融，建议您将血清分装使用。

  2. 使用和保存注意事项

  血清沉淀很难预测和避免，出现沉淀后也无需担忧，这并不会影响血清的品质。已知血清沉淀在以下条件下会有增多的可能：

  1) 热灭活;

  2) 37℃培养;

  3) 反复冻融;

  4) 伽马射线照射;

  5) 2-8℃长期保存;

  6) 长期保存于可自动化霜的冰箱中(温度不稳定)。

  血清沉淀的形成机理多种多样，具体的机理尚不十分明确。我们尚不能准确预测和控制血清沉淀的产生。目前市面上所有品牌的血清产品都存在沉淀现象，这一点可以在各品牌官-方网-站上关于沉淀问题的声明上得到证实。

  出现血清沉淀该如何处理?

  我们建议您采用2000 rpm 离心5分钟，取上清使用就好，比过滤方便，不需要另外准备滤心和针筒，又不容易污染。

  总 结：血清产品中出现沉淀属于常见现象，但不会影响血清的品质，对细胞培养而言也是没有任何问题的，大家可以放心使

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